第0圖分別繪示出依據本發明一實施方式，經I7457與I7557處理之抗伊馬替尼之CML K562R細胞中磷酸化組蛋白H3的含量。 細胞週期分析進一步顯示出有至少60%的CML細胞停滯於G2/M期，且處於亞G1(sub-G1)群的細胞族群會隨著I7457或I7557劑量增加而增加(參見表1)。 只有在細胞存活時，才能進行這種還原作用；因此通常會利用MTT分析來評估細胞存活與增殖的能力。 簡言之，使細胞和10或20 μM的試驗化合物(如，I7457 or I7557)接觸48或72小時；之後加入MTT染料(500 μg/ml)，並讓還原反應進行4小時；而後加入500 μl的異丙醇以終止還原反應。 所述實施方式與專有名詞是為了闡述發明內容之用，並非用以限制本揭示內容範疇。 本揭示內容範疇也涵蓋並未特意揭示於此，但習知技藝人士在閱讀過本揭示內容後可輕易推知的其他實施方式。
上文提出之說明書、實施例與資料的目的在於使本說明書的結構完備，並作為實作本發明之例示。 雖然本揭示內容已以實施方式揭露如上，然其並非用以限定本揭示內容，任何熟習此技藝者，在不脫離本揭示內容之精神和範圍內，當可作各種之更動與潤飾，因此本揭示內容之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。 第1與2圖分別繪示出I7457與I7557對於抗伊馬替尼CML細胞之細胞存活率的影響。 圖中所示的結果顯示I7457與I7557皆可有效減少細胞數目，且此一效果與劑量相關；當使用20 μM的試驗化合物時，可使抗藥性CML細胞的數目至少減少為對照組細胞的65%。 實施例1 I7457與I7557可抑制抗藥性CML K562R細胞之生長 利用上文「材料與方法」部分所述的步驟進行誘導而得到對伊馬替尼具抗性的人類CML細胞株K562R。 分別利用細胞存活與細胞週期分析以及免疫墨點分析與劉氏染色法來評估I7457與I7557的抑制生長活性。
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這類藥劑的實例包括，但不限於，抗癌藥物、抗血管增生藥物、抗病毒藥物、抗生素、減輕疼痛藥物、抗貧血藥物、細胞激素、G-CSF、抗嘔吐藥物以及其他類似物。 上述這些發現，暗示本發明化合物可作為能治療癌症(包括具抗藥性之癌症)之醫療性藥劑的先導化合物。 圖9是戈氏副擬桿菌菌株MTS01在活體內植入LLC細胞之後的第21天之時抗肺癌上的效用之活體分子影像圖。 由圖9可見，與正常對照組相較之下，病理對照組測得的冷光強度有顯著的增加。 然而，與病理對照組相較之下，實驗組測得的冷光強度有顯著的降低。
治療的首要目標是要在不傷及身體其他部位的情況下，將癌細胞完全移除。 但由於癌細胞極易侵犯周圍組織或是透過微遷移而轉移至身體其他遠端部位，致使手術切除癌細胞的應用層面受到限制。 「化學藥物治療」顧名思義就是以可摧毀癌細胞的藥物來進行治療。 現階段，「化學藥物治療」通常是指使用可快速影響細胞分裂的毒性藥物進行治療。 化學藥物治療 但是，在某些情況下，癌細胞卻會對一或多種這類細胞毒性藥物發展出抗藥性或是變得不敏感，因此，有許多相關研究希望找到能夠成功治療癌症，特別是具有抗藥性或是對抗癌藥物不敏感，的其他有效治療藥物或是手段。
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細胞存活率分析的結果顯示，相較於對照組細胞，I7457與I7557在20μM的濃度下能夠有效地減少癌細胞數目至少70%(資料未顯示)。 細胞週期分析顯示以I7457與I7557治療後僅需24小時，即可使至少45%的細胞停滯於G2/M期，且處於亞G1群的細胞數目隨著I7457或I7557的劑量提高而增加(資料未顯示)。 至於和細胞週期相關的蛋白質，其表現量與上文針對抗藥性CML細胞所述的表現模式相似(資料未顯示)。 細胞存活率分析的結果顯示，與對照組細胞相較之下，I7457與I7557在20 μM的濃度下能夠有效地將癌細胞的數目減少至少50%(資料未顯示)。
然而，與病理對照組相較之下，實驗組小鼠的體重增加 隨著同時餵食本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01而有顯著的增加，而比較組的小鼠則無此現象。 本實施例的結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01可有效地改善LLC引起的個體體重減輕的問題。 該小鼠係飼養在無特定病原體的設施中，並按照美國國立衛生研究院的指導原則進行治療。
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該戈氏副擬桿菌是寄存於德國微生物菌種保存中心；民國107年10月29日；編號DSM 32939；以及寄存於食品工業發展研究所；民國108年2月15日；編號BCRC 。 戈氏副擬桿菌為絕對厭氧細菌，需於37℃之無氧培養箱培養約48小時；其中，該系統包含10%的二氧化碳、10%的氫氣、及80%的氮氣。 該菌之液態培養液為NIH巰基乙酸肉湯(購自BD，美國，編號為225710)，固態培養基則為厭氧血液瓊脂盤(Ana.BAP)(購自啟新生物科技公司，台灣)。 該菌長期保存於-80℃冰箱，保護液為25%之甘油，無須特殊降溫處理，且可經由冷凍乾燥進行保存，以穩定其活性。 當可理解上述實施方式與實施例僅為例示，且熟習此技藝者可對齊進行各種修飾。
治療有效量同時也是指化合物或組合物所致的毒性或有害的效果不及於其所帶來的治療利益。 化學藥物治療 在較佳的情形中，本發明之化合物或組合物於投藥時，應採用適當的劑量並持續一段時間，以使得症狀的數目和/或嚴重性得以降低。 若以腸胃外方式施用，可將本發明化合物配方成為液態的藥學組合物，其可為能以靜脈內注射、肌肉內注射、皮下注射或腹膜內注射等方式施用的無菌溶液或懸浮液。
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攝護腺癌經常出現骨頭轉移，像是髖關節、脊椎骨、骨盆等處。 轉移至骨頭後，會造成患者骨頭疼痛、患處骨頭容易骨折、脊髓神經受到壓迫導致下肢癱瘓、可能會讓骨頭中的鈣釋放到血液中，引發高血鈣症而讓人噁心無力。 化學藥物治療 當患者符合高風險攝護腺癌的任何一項指標，代表攝護腺癌的進展可能比較快、轉移機會比較高。 若評估患者健康狀況預計存活期超過五年，便會建議患者積極接受治療。
- 腸胃外施用方式包括例如肌肉內注射、靜脈注射、皮下注射或腹膜內注射等系統性方式施用。
- 適合以本發明化合物進行治療的癌症是選自胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)及食道癌組成的群組中。
- 由圖8可見，與正常對照組相較之下，病理對照組測得的冷光強度有顯著的增加。
- 在其他實施方式中，本發明化合物的量至少約為該藥學組合物總重量的10%。
- 值得注意的是，雖然攝護腺癌經常給人較溫和的印象，但請別小看攝護腺癌，因為部分攝護腺癌生長較快、容易轉移，對生命造成威脅。
- 本實施例的結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01可有效地改善LLC引起的個體體重減輕的問題。
然而，與病理對照組相較之下，實驗組測得的冷光強度雖會隨著LLC細胞植入時間有增加的情形，但增加幅度卻有顯著的降低。 本實施例的結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01在活體內不同時間點皆具有抗肺癌效用。 圖1是戈氏副擬桿菌菌株MTS01在增加帶有肺癌之小鼠的存活率上的效用之數據圖。 由圖1可見，靜脈注射LLC細胞21天後，病理對照組小鼠的存活率為20%，實驗組小鼠的存活率為50%，並高於比較組小鼠的存活率，而正常對照組小鼠在整個實驗期間是健康且存活的。 本實施例的結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01可增加帶有肺癌之小鼠的存活率。 利用本發明實施例之戈氏副擬桿菌於治療肺癌時，可為但不限於以口服方式給藥。
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之後，使用玻片掃描儀對蘇木精與曙紅(Hematoxylin and Eosin,H&E)染色的肺部進行組織學檢查，並對整個肺葉拍照。 使用H&E染 色的肺部切片進行全玻片掃描及500μm或250μm光學變焦的代表性影像。 化學藥物治療 為了研究戈氏副擬桿菌對改善LLC引起的體重減輕的影響，在實驗期間的4週內每週監測各組小鼠的體重。 體重增加的計算公式為最終體重(4週)減去起點體重(0週)。 本實施例中所用之戈氏副擬桿菌(Parabacteroides goldsteinii,P.goldsteinii)MTS01是一種能治療肺癌的益生菌株。
本實驗結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01在活體內植入LLC細胞之後的第21天之時具有抗肺癌效用。 圖8是戈氏副擬桿菌菌株MTS01在活體內植入LLC細胞之後的第14天之時抗肺癌上的效用之活體分子影像圖。 由圖8可見，與正常對照組相較之下，病理對照組測得的冷光強度有顯著的增加。 本實驗結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01在活體內植入LLC細胞之後的第14天之時具有抗肺癌效用。 圖7是戈氏副擬桿菌菌株MTS01在活體內植入LLC細胞之後的第7天之時抗肺癌上的效用之活體分子影像圖。 由圖7可見，與正常對照組相較之下，病理對照組測得的冷光強度有顯著的增加。
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在本文中，「治療(treating或treatment)」一詞意指對癌細胞或一個體施用所述化合物，以使至少45%、50%、55%、60%或65%的癌細胞生長停滯在G2/M週期而延緩癌細胞生長，藉使腫瘤體積縮小。 化學藥物治療 因此，「治療」一詞在此亦表示殺死癌細胞或誘發癌細胞的細胞凋亡。 可將本發明之上述醫藥品或藥學組合物調製成多種可供局部表面給藥的劑型。 可使用此領域中習知的各種皮膚可接受的惰性輔劑在這類劑型中。 適合皮膚表面施用之配方包括液體、乳霜、乳液、乳膏、凝膠、噴劑、氣霧噴劑、皮膚貼片等類似物。 常用的惰性輔劑如水、乙醇、聚乙烯吡咯啶、丙二醇、礦物油、硬脂醇及其他可形成膠狀物的材料。
- 在另一實施例中，可透過本發明兩種化合物之任一種進行治療的癌症是胰臟癌，其預斷性差且對於患有局部晚期胰臟癌或是胰臟癌已轉移的患者來說，平均存活時間分別只有約10個月及6個月。
- 總結來看，本實施例的各項結果顯示在經過I7457與I7557治療的抗藥性CML細胞中，有絲分裂現象受到了抑制。
- 圖4是戈氏副擬桿菌菌株MTS01在抑制肺腫瘤生長上的效用之外觀照片。
每天可施用至個體身上之本發明化合物的有效用量約為10、20、30、40、50、60、70、80、90或100毫克/公斤個體體重；較佳是約30-70毫克/公斤個體體重，例如約30、40、50、60、70毫克/公斤個體體重。 在某些實施方式中，所述方法更包含在對該個體施用I7457或是I7557之後，再對該癌症施以放射線處理。 戈氏副擬桿菌菌株MTS01在活體內不同時間點抗肺癌上的效用評估 本實施例中使用的實驗動物、戈氏副擬桿菌、迪氏副擬桿菌及路易氏肺癌之種類及培育方式是相同於實施例1所記載者。 接著，將正常對照組、病理對照組及實驗組小鼠的肺葉固定於10%中性緩衝福馬林(neutral-buffered formalin)中處理，然後以石蠟包埋並切成4μm的厚度。
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7.海福刀高頻超音波治療：利用經直腸超音波定位，以高溫80到90度，把攝護腺精準加溫，達到殺死癌細胞的目的。 有最低的尿失禁併發症，對勃起功能障礙的影響也最少，但有可能造成膀胱頸結疤阻塞的副作用。 當攝護腺癌出現轉移時，症狀就會變得很多樣，也讓患者更加不適。
因此，本揭示內容第一態樣是提供一種可用來治療一個體之癌症的方法。 所述方法包含對該個體施用一治療有效量的I7457或是I7557或是其藥學上可接受的鹽類。 適合以本發明化合物進行治療的癌症是選自胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)及食道癌組成的群組中。 在一較佳實施方式中，上述CML乃是對伊馬替尼(imatinib，以此為活性成分之抗癌藥物的商品名為基利克膜衣錠)具有抗性的CML癌細胞。 所述方法包括對該個體施用一治療有效量的上述兩種化合物之一或是其藥學上可接受的鹽類。